De la plante à la peau : exploration des extraits d’Alnus glutinosa pour des applications cosmeceutiques

Référence : Antioxidants (Basel) 2025. — PMID 41300432 · DOI 10.3390/antiox14111275 Type : etude in vitro · Plante : Aulne glutineux · Propriété → Peau Accès : ⭐ libre (open access) → texte intégral traduit Fidélité : traduction intégrale et fidèle du texte des auteurs. Appels [n] omis ; figures/tableaux « [ ] ».


Résumé

Cette étude explore le potentiel photoprotecteur et antioxydant d’émulsions cosmétiques formulées avec des extraits d’Alnus glutinosa (aulne noir). L’extraction des composés bioactifs a été réalisée à l’aide des techniques Soxhlet, assistée par ultrasons et assistée par micro-ondes, avec l’éthanol et l’eau comme solvants. Les profils phytochimiques des extraits obtenus ont été caractérisés par spectroscopie UV-Vis, spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier (FTIR) et chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse à haute résolution (LC-HRMS). Les extraits ont été incorporés dans des émulsions huile-dans-eau et évalués pour leur activité antioxydante à l’aide du test de piégeage du radical DPPH, de la stabilité du pH et de la viscosité, et des valeurs colorimétriques Lab*. Parmi les méthodes d’extraction, l’extraction Soxhlet à base d’éthanol a donné la plus forte concentration de composés bioactifs et a démontré une efficacité antioxydante et photoprotectrice supérieure. Il s’agit du premier rapport évaluant les propriétés antioxydantes d’émulsions enrichies en A. glutinosa, soutenant leur application comme cosmeceutiques multifonctionnels d’origine végétale pour la protection de la peau.

1. Introduction

Les cosmeceutiques, secteur en expansion rapide au sein de l’industrie des soins personnels naturels, représentent une classe de produits qui comblent le fossé entre les cosmétiques et les produits pharmaceutiques. Les ingrédients naturels sont utilisés dans les applications dermatologiques depuis des siècles, et leur incorporation dans les formulations de soins de la peau contemporaines ne cesse d’augmenter. Les extraits botaniques possèdent un large spectre de propriétés antioxydantes, principalement en raison de leur riche teneur en composés phénoliques, flavonoïdes et autres métabolites secondaires. Le criblage extensif de divers extraits végétaux — tels que Punica granatum (grenade), Syzygium aromaticum (girofle), Mangifera indica (amande de mangue) et Phyllanthus emblica (amla) — a confirmé une puissante capacité à piéger les espèces réactives de l’oxygène et les radicaux libres à l’aide de tests in vitro comme le DPPH et la résonance de spin électronique (ESR). Ces antioxydants jouent un rôle central dans la neutralisation du stress oxydatif, impliqué dans le vieillissement cutané et diverses maladies. Ces agents exercent des effets thérapeutiques localisés, fournissant des nutriments essentiels qui soutiennent l’homéostasie cutanée et contribuent à la prévention des troubles cutanés dégénératifs.

En réponse à l’intérêt croissant des consommateurs pour les ingrédients multifonctionnels d’origine végétale, les extraits dérivés d’Alnus offrent une approche durable et éco-responsable pour améliorer l’efficacité et la valeur commerciale des formulations topiques. Alnus glutinosa (A. glutinosa), également connu sous le nom d’aulne noir, est un antioxydant naturel prédominant en Europe, en Afrique du Nord et en Asie occidentale, qui peut réduire le stress oxydatif sur la peau ou protéger les produits de la dégradation oxydative. L’activité antioxydante des extraits de feuilles et d’écorce d’A. glutinosa est principalement attribuée à sa riche composition en composés polyphénoliques, notamment les diarylheptanoïdes, les tanins et les flavonoïdes. Ces composés ne sont pas seulement des piégeurs de radicaux libres, mais aussi des modulateurs des réponses cellulaires au stress oxydatif, ce qui en fait des bioactifs efficaces aux bénéfices thérapeutiques et préventifs contre les dommages oxydatifs cutanés, l’inflammation et le vieillissement. Une preuve de l’activité antioxydante a été rapportée par Dinić et al., qui ont isolé deux diarylheptanoïdes de l’écorce d’A. glutinosa — le platyphylloside et un dérivé coumaroyle de celui-ci. Les résultats obtenus ont montré que ces substances réduisaient drastiquement la production d’espèces réactives de l’oxygène (ROS) à la fois dans les cellules cancéreuses et saines exposées à la doxorubicine et au cisplatine. De même, Skrypnik et al., utilisant des extraits aqueux d’A. glutinosa, ont rapporté une teneur phénolique totale allant jusqu’à 29,0 ± 5,3 mg g⁻¹ et une activité de piégeage des radicaux aussi élevée que 276 ± 29 mg g⁻¹, surpassant les extraits de pin et de chêne.

Outre leur activité antioxydante notable, les extraits d’A. glutinosa démontrent un potentiel de photoprotection, attribué à leur riche teneur phénolique. Des composés tels que les polyphénols, les flavonoïdes et les tanins possèdent des caractéristiques structurelles — à savoir des doubles liaisons conjuguées et des cycles aromatiques — qui permettent l’absorption des rayonnements UVA et UVB, indiquant leur capacité à protéger la peau contre les dommages induits par le soleil et les UV. Bien que l’efficacité de protection solaire des extraits d’A. glutinosa dans les émulsions cosmétiques n’ait pas encore été systématiquement évaluée, leur similarité de composition avec d’autres extraits botaniques riches en polyphénols — couramment utilisés comme renforçateurs naturels de SPF — suggère un potentiel considérable pour des applications photoprotectrices. Dans l’étude de Skrypnik et al., les niveaux de flavonoïdes totaux (jusqu’à 21,5 mg g⁻¹ dans l’écorce d’aulne) et de proanthocyanidines (3,8 mg g⁻¹) ont été comparés à une activité élevée de piégeage des radicaux, marqueur secondaire de la capacité photoprotectrice. Cela concorde avec des recherches plus complètes ayant établi que de tels composés sont capables de bloquer le stress oxydatif induit par les UV dans des cellules cutanées en culture. Sur le plan mécanistique, les antioxydants annulent les effets délétères du rayonnement UV en neutralisant les ROS produits dans la peau exposée. Les ROS sont des médiateurs clés des dommages cutanés induits par les UV et contribuent à la dégradation du collagène, à l’inflammation et au photovieillissement. Les antioxydants qui réduisent les ROS peuvent donc augmenter significativement la photoprotection de la peau et retarder le photovieillissement. De plus, Dinić et al. ont démontré que les diarylheptanoïdes d’A. glutinosa non seulement supprimaient les ROS mais préservaient également l’intégrité mitochondriale tout en prévenant l’apoptose dans les cellules normales exposées à un stress chimiothérapeutique. Ce dernier effet cytoprotecteur peut également être extrapolé à la protection contre les dommages induits par les UV dans les cellules, confirmant davantage l’effet photoprotecteur de ces composés.

Cette étude visait à optimiser les conditions d’extraction d’Alnus glutinosa et à évaluer l’incorporation de ses extraits dans des émulsions cosmétiques. Compte tenu de leur profil phénolique, une investigation plus approfondie du rôle des extraits dans l’activité antioxydante et la protection UV dans les formulations cosmétiques est justifiée. Des techniques d’extraction conventionnelles (macération à froid et ébullition à reflux) et avancées (assistée par ultrasons et assistée par micro-ondes) ont été évaluées. Le profil phytochimique des extraits a été analysé par LC–HRMS pour la caractérisation qualitative des composés bioactifs. Des méthodes spectroscopiques, dont l’UV-Vis et la FTIR, ont été employées pour une caractérisation plus poussée. L’activité antioxydante a été évaluée via le test DPPH. À notre connaissance, bien qu’A. glutinosa ait été étudié dans le domaine pharmaceutique, aucune publication évaluée par des pairs n’a à ce jour étudié l’utilisation d’extraits isolés dans des formulations cosmeceutiques.

2. Matériels et méthodes

2.1. Produits chimiques et méthodes d’isolement des extraits

Le feuillage d’Alnus glutinosa a été obtenu commercialement auprès d’un fournisseur local (Kilkis, Grèce) et séché à l’air (à 25 °C dans l’obscurité, à l’air immobile pendant 3 jours). Les matériaux ont ensuite été pulvérisés en une fine poudre à l’aide d’un broyeur mécanique et stockés dans des sacs hermétiques pour analyse ultérieure. La préparation des extraits d’A. glutinosa a été réalisée selon trois méthodes différentes, et chaque test a été effectué en triplicat. Après optimisation de chaque procédé d’extraction, les extraits isolés ont été analysés par spectroscopie UV-Vis. Tous les procédés ont été réalisés avec une quantité de feuillage en poudre de 5 g pour 100 mL de solvant, tandis que tous les autres réactifs employés étaient de qualité analytique.

2.1.1. Extraction assistée par ultrasons

Un total de 5 g des échantillons végétaux a été prélevé et ajouté à 100 mL d’EtOH placés dans le bécher. Le bécher a été recouvert de papier d’aluminium pour éviter la perte de solvant par évaporation. La sonde ultrasonique MS3 MicroTip3 (amplitude maximale : 180 ; W/cm³ : 460) du processeur ultrasonique UP100H (Controla S.A, Thessalonique, Grèce) a été positionnée à l’intérieur du bécher et la solution a été soumise aux ultrasons à une fréquence de 30 kHz à 25 °C et 70 °C pendant une durée prédéterminée de 60 min. Une fois l’extraction terminée, la sonication a été arrêtée et le liquide surnageant a été filtré sous vide pour isoler l’extrait pur. Le filtrat a été hermétiquement fermé et stocké à basse température pour référence future. La densité optique a été déterminée à l’aide d’un spectrophotomètre UV-VIS.

2.1.2. Extraction en extracteur Soxhlet

Pour la méthode d’ébullition à reflux utilisant un extracteur Soxhlet, 5 g de poudre d’A. glutinosa ont été placés dans un ballon à fond rond et pesés, et l’extraction par reflux a été réalisée dans trois conditions différentes pour optimiser le procédé. L’appareil a été chauffé sur une chauffe-ballon électrique de laboratoire à pression ambiante. Plus précisément, de l’eau déionisée (DI) a été employée comme solvant à 70 °C et 90 °C, respectivement, pendant 3 h, ainsi que de l’éthanol pur à 70 °C pendant 1 h [ ]. Une fois l’ébullition terminée, le liquide surnageant a été filtré sous vide pour isoler l’extrait pur.

2.1.3. Extraction assistée par micro-ondes

Un four à micro-ondes domestique (NN-S255W, Panasonic, Tokyo, Japon) a été utilisé dans la présente étude avec une capacité totale de 1100 W. Les échantillons végétaux (5 g) ont été mélangés à l’eau DI (100 mL) et placés dans un bécher, puis chaque bécher a été inséré seul dans le four à micro-ondes.

Les mélanges ont été soumis à un rayonnement micro-ondes à 330 W, suivant la méthode décrite par Pan et al. avec de légères modifications pour atteindre un temps d’irradiation total de 3 min : 45 s de mise sous tension, suivies de 30 s d’arrêt, puis 15 s supplémentaires de mise sous tension. Après chaque 60 s d’irradiation, l’échantillon a été laissé refroidir à température ambiante.

2.2. Caractérisation des extraits

2.2.1. Analyse gravimétrique

À la fin de chaque procédé d’extraction, les échantillons ont été filtrés et le solvant a été évaporé par évaporation rotative. Les extraits purifiés ont été placés en réfrigération pendant la nuit et ont ensuite été lyophilisés à l’aide d’un système de lyophilisation Scavnac (Coolsafe 110-4 Pro, LaboGene Scandinavia, Hovedstaden, Danemark) à −80 °C pendant 24 h. Les extraits bruts ont été stockés à 4 °C. Le rendement de l’extrait a été calculé en déterminant le poids de l’extrait séché par gramme de matière végétale utilisée, selon l’équation suivante. Toutes les mesures ont été effectuées en triplicat. (1) rendement de l’extrait % = extrait obtenu (g) / quantité de poudre végétale utilisée × 100

2.2.2. Spectrométrie UV-Vis

L’évaluation quantitative des extraits isolés a été réalisée par spectrométrie UV-Vis. Un spectrophotomètre Shimadzu UV-1800 équipé du logiciel UV Probe ver. 2.61 (Shimadzu, Kyoto, Japon) a été utilisé pour obtenir les spectres d’absorption après dilution appropriée des extraits. Les spectres UV-VIS des composés colorants de chaque matière végétale ont été enregistrés dans le domaine visible entre 400 et 700 nm. Les solutions extraites ont ensuite été analysées en mesurant leurs valeurs d’absorbance soit à la longueur d’onde correspondant à l’absorbance maximale (λmax), soit à une longueur d’onde spécifique désignée.

2.2.3. Spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier (FTIR)

Les spectres FTIR ont été obtenus à l’aide d’un spectromètre FTIR Perkin-Elmer (Perkin Elmer, Waltham, MA, USA), modèle SPECTRUM 1000, en utilisant des pastilles de KBr. Les spectres des extraits ont été pris dans le domaine 4000–500 cm⁻¹, avec une résolution de 4 cm⁻¹ et 16 balayages, et ont été corrigés en ligne de base et convertis en mode absorbance à l’aide du logiciel Spectrum v.5.3.1 (2004).

2.2.4. LC-Orbitrap-HRMS

L’analyse instrumentale a été réalisée à l’aide d’un système Q Exactive Focus Orbitrap LC-MS/MS (Thermo Fisher Scientific, Brême, Allemagne). Le montage de chromatographie liquide (LC) comprenait un système UHPLC Vanquish Flex équipé de pompes binaires, d’un passeur d’échantillons à température contrôlée et d’un compartiment à colonne. La séparation a été réalisée sur une colonne Thermo Hypersil GOLD aQ (50 × 2,1 mm, 1,9 μm) avec support et pré-filtre à cartouche, maintenue à une température constante de 40 °C tout au long de l’analyse.

Les phases mobiles étaient constituées d’eau (A) et de méthanol (B), toutes deux acidifiées avec 0,1 % (v/v) d’acide formique (FA). Le programme de gradient commençait à 10 % B, maintenu pendant 1,5 min ; puis il était augmenté à 60 % B au cours des 2,5 min suivantes, suivi d’une hausse à 70 % B sur 4 min, atteignant 100 % à 11 min, ce qui était maintenu pendant 1 min. La composition de la phase mobile était ensuite ramenée aux conditions initiales en une minute et maintenue pendant 2 min pour permettre le rééquilibrage. Le temps total d’analyse était de 15 min à un débit constant de 200 µL/min. Le volume d’injection était fixé à 5 µL et le plateau du passeur d’échantillons était maintenu à 10 °C.

Pour la spectrométrie de masse, l’ionisation a été réalisée via une sonde d’ionisation par électronébulisation chauffée (HESI-II), modèle Ion Max, en mode de commutation de polarité. Les réglages de l’instrument suivaient les paramètres par défaut du système optimisés pour un débit LC de 0,2 mL/min : tension de lentille tubulaire à 110 V ; débits des gaz de gaine, auxiliaire et de balayage à 45, 10 et 2 unités arbitraires (au), respectivement, fournis par un générateur d’azote de haute pureté (Peak Scientific Genius 1022, Inchinnan, Royaume-Uni) ; tensions de pulvérisation de 3,5 kV en mode positif et 2,7 kV en mode négatif ; et niveau RF de la lentille S fixé à 50. Enfin, la température du réchauffeur de gaz auxiliaire était de 400 °C, la température du capillaire était fixée à 320 °C. Les ions précurseurs (balayage complet, MS1) ont été scannés dans le domaine 100–1000 m/z avec un pouvoir de résolution de 70 000 (à m/z 200). Pour faciliter l’élucidation structurale, une acquisition dépendante des données (dd-MS2) a été employée en parallèle, fonctionnant en mode Discovery pour déclencher les événements MS2 en fonction de l’intensité des ions précurseurs. La fragmentation des ions sélectionnés a été réalisée à l’aide d’énergies de collision normalisées échelonnées de 20, 35 et 50 eV, et les spectres MS2 ont été enregistrés à une résolution de 35 000. Le contrôle de l’instrument et l’analyse qualitative initiale ont été effectués à l’aide du logiciel Xcalibur version 4.1.

Traitement des données dans Compound Discoverer

L’analyse non ciblée a été réalisée à l’aide du logiciel commercial Compound Discoverer 3.3 (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA). Plusieurs nœuds de traitement ont été appliqués pour développer un flux de travail de criblage dédié à la déconvolution des données brutes Orbitrap MS [ ]. Les fichiers d’échantillons ont été importés et étiquetés comme blancs de solvant, échantillons ou contrôles qualité (QC). Le flux de travail prêt à l’emploi intitulé « Food Research w Stats Unknown ID w Online and Local Database Searches » a été sélectionné avec des modifications mineures. Les spectres ont été filtrés dans le nœud « Select Spectra » selon des critères incluant une intensité totale supérieure à 1 × 10⁶, un rapport signal-sur-bruit supérieur à 10 et des temps d’acquisition entre 0,5 et 14 min. L’alignement des temps de rétention (RT) a été réalisé à l’aide de l’algorithme à courbe adaptative, avec une différence de RT maximale autorisée de 0,1 min entre les échantillons ; un alignement de repli a été exécuté via un modèle linéaire. Les caractéristiques de masse passant ces paramètres ont été introduites dans le nœud « Detect Compounds » pour la détection des ions et des pics, suivie d’un regroupement à travers tous les échantillons avec une tolérance de temps de rétention de 10 s et un seuil de correspondance de composition de 25 %. Les signaux de fond ont été minimisés en filtrant les pics présentant un rapport d’intensité échantillon-sur-blanc inférieur à 5:1. Les points de données manquants dus à un mauvais alignement ont été corrigés automatiquement à l’aide du nœud « Filling Gaps ». Pour l’annotation des composés, les nœuds « Search mzCloud », « Search ChemSpider », « Search Mass Lists » et « Predict Compositions » ont été appliqués. Le nœud « Search mzCloud » comparait les spectres MS et MS2 à la base de données en ligne mzCloud à l’aide de l’algorithme HighChem HighRes. Le nœud « Search ChemSpider » recherchait dans des bibliothèques sélectionnées, dont ACToR (Aggregated Computational Toxicology Resource), les bases de données FDA (Structured Product Labeling index et UNII-NLM), FooDB et Phenol-Explorer. La prédiction de composition élémentaire était limitée à un maximum de C200 H800 Br5 Cl4 F5 N5 O80 P5 Si dans le nœud « Predict Compositions ». La tolérance de masse pour toutes les recherches était fixée à 5 ppm. Après l’annotation, un filtrage supplémentaire n’a conservé que les composés avec des scores de correspondance mzCloud supérieurs à 70 %, correspondant à un niveau de confiance d’identification de 2a selon Schymanski et al. (2014).

2.3. Préparation des émulsions

Les émulsions H/E ont été préparées selon une technique issue de travaux antérieurs comprenant trois étapes : (1) préparation de la phase aqueuse, (2) préparation de la phase huileuse et (3) mélange des deux phases jusqu’à la formation d’une émulsion stable. La procédure expérimentale est illustrée en Figure 1 [ ]. Tous les ingrédients [ ] utilisés sont répertoriés par la FDA comme sûrs et ont été approuvés pour les applications cosmétiques. Chaque extrait isolé a été utilisé pour la préparation de l’émulsion correspondante, tandis qu’une crème supplémentaire a également été préparée servant d’échantillon de référence, sans extrait.

(1) La phase huileuse (23 %) a été préparée dans un bécher avec de l’huile d’olive (11 %), de l’alcool cétostéarylique (2 %), de l’alcool cétylique (2 %), du polysorbate-60 (2 %), de l’acide stéarique (2 %), du beurre de karité (2 %) et enfin de la cire d’abeille (2 %).

(2) Les deux béchers ont été placés dans un bain-marie avec la température réglée à 80 °C jusqu’à ce que tous les ingrédients soient complètement homogénéisés. La phase huileuse a été ajoutée lentement à la phase aqueuse tout en agitant à 600 tr/min à l’aide d’un agitateur mécanique 2020 RZR (Heidolph, Schwabach, Allemagne), la température étant maintenue à 80 °C. Une fois la phase huileuse entièrement incorporée, le chauffage a été arrêté, mais l’agitation a continué dans le bain-marie. L’agitation a duré environ 1,5 à 2 h, jusqu’à ce que l’émulsion (crème) soit entièrement formée. Comme le phénoxyéthanol (1 %) et l’éthylhexylglycérine (1 %) sont des conservateurs volatils, ils n’ont été ajoutés qu’une fois la température descendue en dessous de 40 °C. Les émulsions obtenues ont ensuite été transférées dans des récipients en plastique et stockées dans un environnement frais et sombre.

2.4. Analyse des propriétés des émulsions

2.4.1. Stabilité du pH et de la viscosité

La stabilité des émulsions préparées a été évaluée en surveillant le pH et la viscosité sur des périodes de 1, 7, 14, 30, 60 et 90 jours après la préparation. Le pH a été mesuré en immergeant un capteur de pH à microprocesseur (WTW pH 535, Gemini BV, Apeldoorn, Pays-Bas) directement dans les émulsions. Pour les mesures de viscosité à 50 et 100 tr/min, un viscosimètre rotatif Visco Star plus (Fungilab, SA, Barcelone, Espagne) a été employé. Après avoir testé divers mobiles, le mobile R3 a été sélectionné comme le plus approprié et a été immergé à une profondeur constante dans les récipients en plastique pendant la mesure.

2.4.2. Mesure de la couleur

Les échantillons ont été analysés à température ambiante pour les variations de couleur à l’aide d’un spectrophotomètre portable MiniScan XE Plus (HUNTERLAB, Washington, VA, USA). L’évaluation de la couleur a été menée en mesurant les changements des composantes LabCh de la Commission Internationale de l’Éclairage (CIE). Cet espace colorimétrique à cinq dimensions comprend L* (luminosité), allant de 0 (noir) à 100 (blanc) ; a* représentant la rougeur (valeurs positives) ou la verdeur (valeurs négatives) ; b* représentant la jauneur (valeurs positives) ou la bleuité (valeurs négatives) ; et C* (chroma, indiquant la saturation de couleur) et H* (angle de teinte).

2.4.3. Étude antioxydante

La capacité antioxydante des émulsions a été évaluée à l’aide du test DPPH (2,2-diphényl-1-picrylhydrazyle). Une solution de DPPH à 50 mg/L dans l’éthanol (Lot# STBH7297, Sigma Aldrich®, Burlington, MA, USA) a été préparée, et des solutions d’émulsions ont été réalisées à 1 % p/v dans l’éthanol. Ensuite, 1 mL de chaque solution d’émulsion a été mélangé à 3 mL de la solution de DPPH et soniqué pendant 30 min. Pour éviter l’exposition à la lumière pendant la réaction, tous les flacons ont été soigneusement enveloppés dans du papier d’aluminium. Un contrôle à blanc a été préparé en mélangeant 1 mL d’éthanol pur à 3 mL de solution de DPPH. Les mesures d’absorbance ont été réalisées à l’aide d’un spectrophotomètre UV-Vis équipé d’une lampe W, enregistrant au maximum d’absorbance du DPPH de 517 nm. Les mesures ont été enregistrées toutes les 30 min sur une période totale de 90 min. Entre les mesures, tous les échantillons ont été conservés dans l’obscurité pour éviter la photodégradation du radical libre. Une diminution de l’absorbance indiquait une activité accrue de piégeage des radicaux libres des émulsions. L’activité antioxydante a été calculée à l’aide de l’équation suivante : (2) activité de piégeage des radicaux libres % = (Ac − As) / Ac où As et Ac représentent l’absorbance de chaque échantillon et de l’échantillon témoin (sans crème), respectivement.

2.5. Analyse statistique

Les rendements d’extraction et les valeurs de l’espace colorimétrique CIELAB ont été analysés à l’aide du test de Levene pour vérifier l’homogénéité des variances, suivi d’une ANOVA à un facteur avec correction de Tukey pour les comparaisons post hoc multiples. Les données sur le pH, la viscosité et l’activité antioxydante ont été analysées à l’aide d’une ANOVA à mesures répétées, en appliquant la correction de Greenhouse–Geisser pour ajuster les violations de l’hypothèse de sphéricité. Les comparaisons par paires post hoc ont été ajustées à l’aide de la correction de Bonferroni, tandis que la correction de Tukey a été utilisée pour les comparaisons multi-groupes. Toutes les données sont présentées sous forme de moyenne ± ET et p < 0,05 était considéré comme statistiquement significatif. Aucun test de normalité n’a été effectué puisque le nombre d’échantillons est de trois, ce qui rend de tels tests peu fiables et insuffisants pour évaluer les hypothèses distributionnelles. Toutes les analyses ont été effectuées à l’aide d’IBM SPSS Statistics v28.0.

3. Résultats

3.1. Évaluation des propriétés des extraits

Les rendements d’extraction des échantillons d’Alnus glutinosa obtenus par différentes méthodes d’extraction sont présentés dans le Tableau 3 [ ]. Globalement, un effet hautement significatif de la méthode d’extraction sur les rendements d’extraction a été observé (p < 0,001). Plus en détail, toutes les méthodes d’extraction différaient significativement les unes des autres (p < 0,001). Les extractions Soxhlet à l’éthanol (Soxhlet 3) ont produit les rendements les plus élevés, à savoir 42,50 ± 1,10 %, soulignant l’efficacité de l’éthanol dans des conditions d’extraction chaude prolongée. En revanche, les extractions Soxhlet (Soxhlet 1 et 2) à l’eau ont donné une efficacité d’extraction modérée. Les extractions assistées par ultrasons à l’éthanol à 25 °C et 70 °C ont donné respectivement 8,20 ± 0,35 % et 14,60 ± 0,50 %, indiquant que des températures plus élevées améliorent la pénétration du solvant et la diffusion du soluté. L’extraction assistée par micro-ondes à l’eau a produit les rendements les plus faibles (4,80 ± 0,20 %), probablement en raison d’un temps d’extraction limité, d’une efficacité de solvant plus faible ou de la dégradation de composés thermolabiles dans les conditions appliquées.

Les spectres UV-Vis des extraits d’Alnus glutinosa obtenus par les méthodes ultrasons, ébullition à reflux et assistée par micro-ondes ont été enregistrés dans le domaine de longueurs d’onde de 400–700 nm, comme le montre la Figure 2 [ ]. Ce domaine couvre le spectre visible, particulièrement pertinent pour la détection des composés chromophores. Parmi les méthodes évaluées, l’extraction Soxhlet a donné les valeurs d’absorbance globales les plus élevées sur l’ensemble du domaine visible, indiquant une plus grande efficacité d’extraction. L’extraction assistée par ultrasons a montré une absorbance modérée, tandis que l’extraction assistée par micro-ondes a résulté en l’intensité d’absorbance la plus faible. Des pics d’absorption distincts près de 665 nm ont été observés pour toutes les méthodes à l’exception de l’extraction assistée par micro-ondes.

L’analyse LC–HRMS a été réalisée sur deux extraits Soxhlet d’Alnus glutinosa (Soxhlet 2 et 3) pour la caractérisation qualitative de leur composition phytochimique, comme présenté dans le Tableau 4 [ ]. Les principaux composés identifiés comprenaient l’acide quinique (C₇H₁₂O₆), l’acide 3,4,5-trihydroxycyclohex-1-ène-1-carboxylique (C₇H₁₀O₅), l’acide néochlorogénique (C₁₆H₁₈O₉) et l’ester éthylique de l’acide docosahexaénoïque (C₂₄H₃₆O₂). Les extraits étaient également riches en antioxydants naturels tels que les polyphénols, les triterpénoïdes et les flavonoïdes. Les composés notables détectés comprenaient la miquélianine, l’acide gallique, le cafestol, le quercétine-3β-D-glucoside et la lutéoline. Des constituants mineurs comme les acides gras et les acides aminés étaient également présents, ajoutant à la complexité chimique des extraits. Parmi les diarylheptanoïdes, seul le (1E)-1,7-bis(4-hydroxyphényl)hept-1-én-3-one (C₁₉H₂₀O₃) a été détecté. Les données complètes des composés sont répertoriées dans le Tableau S1 [ ].

L’impact de l’eau et de l’éthanol (EtOH) comme solvants dans l’ébullition à reflux a été évalué à l’aide de la spectroscopie FTIR, avec les spectres présentés en Figure 3 [ ]. Les deux extraits présentaient une bande large caractéristique près de 3430 cm⁻¹, correspondant à l’étirement du groupe hydroxyle (–OH), indicatif de liaisons hydrogène. L’extrait éthanolique montrait une bande d’étirement –OH plus nette et mieux définie, tandis que l’extrait aqueux présentait un pic plus large et moins distinct. Un signal triplet dans la région 3000–2800 cm⁻¹ confirmait la présence de vibrations d’étirement C–H, suggérant des groupes méthylène et des contributions carbonyle (C=O) mineures. Une forte absorption dans la région 1620–1600 cm⁻¹ et une bande plus faible à 1260 cm⁻¹ fournissaient une preuve supplémentaire de cétones aromatiques conjuguées. D’autres bandes d’absorption à 1460, 1370 et dans le domaine 1200–900 cm⁻¹ indiquaient des vibrations de flexion et d’étirement C–H. Globalement, la FTIR a confirmé la présence d’hydrocarbures saturés et de groupes fonctionnels hydroxyle, méthylène et carbonyle dans les deux extraits.

3.2. Caractérisation des émulsions

Pour la clarté et la cohérence, les formulations discutées ici seront désignées comme suit : la Crème A correspond à la formulation contenant 70 % d’extrait lyophilisé d’A. glutinosa, la Crème B contient 35 % d’extrait lyophilisé d’Alnus glutinosa, la Crème C comprend 30 % d’extrait lyophilisé d’Alnus et la Crème D fait référence à la formulation incorporant l’extrait éthanolique lyophilisé d’Alnus glutinosa. Cette nomenclature standardisée sera utilisée tout au long du texte pour faciliter la discussion.

3.2.1. Stabilité du pH et de la viscosité

Les valeurs de pH des crèmes préparées ont été surveillées sur une période de 35 jours pour évaluer la stabilité [ ]. Les données ont été analysées à l’aide d’une ANOVA à mesures répétées pour évaluer l’effet du temps au sein de chaque formulation (p = 0,047). Les comparaisons par paires post hoc avec correction de Tukey n’ont révélé aucun changement significatif du pH aux jours 7 et 14 par rapport au jour 1 (p > 0,05). Cependant, des diminutions significatives du pH ont été observées à partir du jour 21 (p < 0,001). Malgré ces différences statistiques, les réductions réelles de pH étaient mineures, indiquant seulement une légère acidification pendant le stockage. La stabilité du pH est probablement due à la nature légèrement acide d’ingrédients clés tels que l’acide stéarique, la cire d’abeille, le beurre de karité et la gomme xanthane. En revanche, les formulations contenant des extraits d’Alnus glutinosa ont montré une diminution continue et progressive du pH au fil du temps, qui était significativement différente des émulsions à blanc aux points temporels correspondants (p < 0,05). Ces résultats suggèrent que les extraits contribuent à une acidification progressive au cours de la période de stockage.

Le comportement rhéologique des émulsions préparées a été évalué sur une période de 35 jours à des taux de cisaillement de 50 et 100 tr/min [ ] et a révélé des informations importantes sur le comportement d’écoulement de la formulation. Le changement de viscosité avec l’augmentation du taux de cisaillement suggère des caractéristiques non newtoniennes, typiques de nombreuses émulsions et fluides complexes. Plus précisément, la diminution observée de la viscosité à des taux de cisaillement plus élevés indique un comportement rhéofluidifiant, où la structure interne de la formulation se décompose sous cisaillement, conduisant à un écoulement plus facile. Ce comportement est avantageux pour les crèmes topiques car il permet un étalement plus facile lors de l’application tout en maintenant la stabilité au repos.

Les deux taux de cisaillement ont montré des effets significatifs du temps (p < 0,001) et du type de crème (p < 0,001). Plus précisément, l’émulsion à blanc, la crème A et la crème B ne différaient pas significativement les unes des autres au fil du temps, tandis que les crèmes C et D différaient. À 50 tr/min, les crèmes C et D différaient déjà significativement de l’émulsion à blanc et des crèmes A et B, ces différences s’accentuant avec le temps. Bien que la crème C ait présenté une viscosité significativement plus élevée de 330 et 335 cP que la crème D, mesurée à 216 et 215 cP au jour 28 (p < 0,001) et au jour 35 (p < 0,001), respectivement, aucune différence globale n’a été observée entre les deux formulations sur l’ensemble de la période d’étude (p = 0,172). À 100 tr/min, cependant, les crèmes C et D différaient significativement lorsqu’elles étaient examinées sur toute la durée (p < 0,001). L’émulsion à blanc a affiché une viscosité constamment faible tout au long de l’étude, avec seulement une légère augmentation au jour 28, reflétant un manque de complexité structurelle. La crème A a montré une augmentation régulière de la viscosité du jour 1 au jour 21, suivie d’un plateau, suggérant le développement d’un réseau au sein de la matrice de l’émulsion. La crème B, avec une concentration d’extrait aqueux plus faible, a présenté des valeurs de viscosité irrégulières, particulièrement à des taux de cisaillement plus élevés, indiquant une formation structurelle faible. La crème C a enregistré la viscosité la plus élevée parmi toutes les formulations, augmentant régulièrement jusqu’au jour 21 avant de se stabiliser. La crème D a suivi une tendance similaire à la Crème C mais avec des valeurs de viscosité légèrement inférieures. Les crèmes C et D ont toutes deux démontré un comportement rhéofluidifiant constant, confirmant des caractéristiques d’écoulement pseudoplastiques.

3.2.2. Détermination des valeurs CIELAB

Les analyses colorimétriques des crèmes ont révélé un effet global significatif sur les valeurs CIELAB et la force de la couleur (L* : p < 0,001 ; a* : p < 0,001 ; b* : p < 0,001 ; C : p < 0,001 ; Tableau 5 et Figure 6 [ ]). Plus précisément, la Crème A, contenant environ le double de la quantité d’extrait (70 %), a présenté la valeur L* la plus élevée (p < 0,001), reflétant une luminosité accrue, tandis que les valeurs a* étaient significativement plus élevées dans les Crèmes B et C par rapport aux autres formulations, respectivement. Cela suggère que les concentrations d’extrait influencent la couleur de la crème en augmentant la luminosité à des niveaux élevés et la rougeur à des niveaux modérés. La Crème D, formulée avec l’extrait éthanolique, a affiché la valeur a* la plus élevée de 6,08 ± 0,17 (p < 0,001) ainsi que la valeur C la plus élevée, à savoir 18,80 ± 0,74 (p < 0,001), produisant une teinte jaune-brun plus foncée. Ces résultats indiquent un décalage prononcé le long de l’axe rouge–vert, avec une plus grande rougeur et saturation de couleur, résultant en une teinte jaune-brun plus foncée, cohérente avec la présence de composés colorés extraits par l’éthanol. Les valeurs élevées de a* et C suggèrent que l’extrait éthanolique contribue à une pigmentation plus forte, probablement due à des constituants bioactifs ou chromophores affectant l’apparence de la crème. En revanche, les Crèmes B et C, formulées avec des extraits aqueux à des concentrations variables, ne différaient pas statistiquement l’une de l’autre en termes de valeurs a* (p = 0,509) et C (p = 0,920), résultant en des teintes beige pâle à jaune clair.

3.2.3. Propriétés antioxydantes

L’activité antioxydante des crèmes a été évaluée sur une période de 90 min dans trois conditions : non diluée (telle que reçue), diluée 1:10 et diluée 1:100 [ ].

À l’état non dilué, toutes les crèmes riches en extrait ont présenté une activité de piégeage du DPPH initiale élevée, attribuable à leur teneur phénolique élevée. À t = 0, les valeurs d’inhibition variaient d’environ 73 % à 79 %. Un effet significatif du temps a été observé (p < 0,001), bien qu’aucun effet de groupe au fil du temps n’ait été détecté. L’activité antioxydante a augmenté dans toutes les crèmes, avec des différences significatives par rapport à t = 0 apparaissant à 30 min (p < 0,018) et au-delà, indiquant une cinétique de réaction relativement rapide.

Pour la dilution 1:10, les valeurs d’inhibition initiales variaient de 19 % à 55 %. Un effet significatif du temps (p < 0,001) et un effet de groupe au fil du temps (p < 0,001) ont tous deux été observés. L’effet du temps était constant à travers tous les groupes, tandis que l’effet de groupe reflétait le fait que les crèmes B et C présentaient une activité antioxydante significativement plus élevée que les crèmes A et D (p < 0,001). Cependant, aucune différence significative n’a été observée entre les crèmes A et B (p = 0,332).

Pour la dilution 1:100, les valeurs d’inhibition initiales variaient de 19 % à 33 %. Comme pour la dilution 1:10, un effet significatif du temps (p < 0,001) et un effet de groupe au fil du temps (p < 0,001) ont tous deux été observés. Alors que tous les groupes montraient une activité antioxydante croissante au fil du temps, l’effet de groupe était attribuable uniquement à la crème C, qui présentait une activité significativement plus élevée que toutes les autres formulations (p < 0,001).

4. Discussion

L’extraction et la purification des phytochimiques à partir de matières végétales sont influencées par plusieurs facteurs, notamment la température d’extraction, le temps, la concentration de solvant et la polarité. En raison de la nature chimique diverse des phytochimiques, leur solubilité varie selon les solvants de polarités différentes. Par conséquent, aucun solvant unique ne peut extraire efficacement l’ensemble du spectre des composés phytochimiques et antioxydants présents dans les plantes. Selon diverses études, le rendement d’extraction et l’activité antioxydante des composés phénoliques dans la matière végétale sont significativement affectés par la polarité du solvant. Le rendement plus élevé des extractibles à l’éthanol par rapport aux extractibles à l’eau observé dans cette étude est cohérent avec la polarité intermédiaire du solvant, qui permet une extraction plus efficace d’une plus large gamme de composés. L’efficacité d’extraction dépend de la correspondance entre la polarité du solvant et la polarité des composés cibles, plutôt que de la seule polarité absolue du solvant. Ghasemzadeh et al. ont rapporté que les mélanges eau-éthanol (50:50 v/v) donnaient des teneurs totales en phénols et flavonoïdes plus élevées que l’éthanol absolu, quelle que soit la méthode d’extraction. De même, Ghaffar et Perveen ont constaté que les mélanges méthanol–eau amélioraient les rendements d’extraction, la teneur phénolique et l’activité de piégeage des radicaux libres. Ces résultats soulignent l’avantage de combiner des solvants polaires et moins polaires pour améliorer l’efficacité d’extraction. Globalement, les résultats renforcent l’importance de sélectionner les solvants et techniques appropriés pour maximiser la récupération phytochimique.

Le domaine spectral visible (400–700 nm) est informatif pour identifier les composés chromophores tels que les phénoliques, les flavonoïdes et les anthocyanes, qui sont prévalents dans les extraits végétaux. Les valeurs d’absorbance plus fortes dans les extraits Soxhlet suggèrent une récupération plus efficace de ces composés, cohérente avec ses capacités d’extraction exhaustive connues. Le pic près de 665 nm dans la plupart des extraits correspond probablement à la chlorophylle A, indiquant sa co-extraction pendant le procédé. Des pics supplémentaires autour de 470 nm et 536 nm sont associés respectivement aux caroténoïdes et aux anthocyanes. L’absorbance réduite observée dans l’extraction assistée par micro-ondes peut résulter de temps d’exposition plus courts ou de la dégradation thermique de composés sensibles, soulignant l’importance d’optimiser les conditions pour préserver les chromophores.

Le profil phytochimique obtenu par LC–HRMS reflète la nature complexe et riche en bioactifs des extraits Soxhlet d’A. glutinosa. L’identification de composés tels que l’acide gallique, l’acide quinique et l’acide néochlorogénique met en évidence le potentiel antioxydant élevé des extraits. Ces acides phénoliques particuliers possèdent des groupes fonctionnels polaires — de multiples fractions hydroxyle et carboxyle — qui améliorent leur solubilité dans l’eau et expliquent leur abondance dans l’extrait aqueux. L’absence de la plupart des diarylheptanoïdes, précédemment rapportés dans l’écorce d’A. glutinosa, est probablement due à l’utilisation exclusive de matériel foliaire dans cette étude, où ces composés peuvent être naturellement absents ou tomber en dessous du seuil de détection. La présence à la fois de constituants bioactifs majeurs et de métabolites secondaires à l’état de traces démontre la valeur des techniques d’extraction et analytiques détaillées pour cartographier le plein potentiel thérapeutique des ingrédients d’origine végétale.

L’analyse FTIR des extraits d’Alnus glutinosa dans l’eau et l’éthanol a permis l’identification d’hydrocarbures saturés, de groupes méthylène et de groupes fonctionnels hydroxyle et carbonyle. Les différences observées dans les spectres FTIR entre les extraits à l’eau et à l’éthanol reflètent l’influence de la polarité du solvant sur les liaisons hydrogène et la résolution spectrale. L’eau, un solvant protique hautement polaire, facilite des liaisons hydrogène étendues et diverses, conduisant à des bandes d’étirement O–H plus larges et moins définies dans la région 3700–3000 cm⁻¹. L’éthanol, avec une constante diélectrique plus faible et une capacité de liaison hydrogène réduite, a produit des bandes O–H plus nettes à des nombres d’onde légèrement plus élevés, indiquant un environnement de liaison plus uniforme. L’élargissement des bandes d’absorption et la résolution réduite des pics dans les extraits aqueux sont également probablement dus à la faible solubilité de certains composés, tels que les anthranoïdes, dans l’eau. À mesure que la concentration de l’extrait augmente, les bandes hydroxyle deviennent plus intenses et se décalent vers des nombres d’onde plus faibles, cohérent avec des liaisons hydrogène accrues. À l’inverse, l’éthanol améliore la clarté spectrale et la séparation des pics en raison de sa polarité modérée et de sa meilleure capacité de solubilisation d’une plus large gamme de phytochimiques.

Le maintien de la stabilité du pH dans les émulsions cosmétiques est essentiel pour la sécurité, l’efficacité et la compatibilité cutanée du produit, la plage topique idéale étant de 4,5 à 6,0. La légère acidification observée dans les formulations contenant des extraits est cohérente avec la nature chimique des composés phénoliques d’origine végétale, qui peuvent se dégrader par oxydation pour libérer de faibles acides organiques. Un tel comportement est courant dans les formulations naturelles riches en composés bioactifs comme les flavonoïdes, les tanins et les diarylheptanoïdes, qui sont sujets à des transformations hydrolytiques et oxydatives au fil du temps. Le décalage du pH vers l’acidité s’aligne avec les rapports de la littérature sur les émulsions botaniques, soulignant les interactions dynamiques entre les composants de l’extrait et les matrices d’émulsion pendant le stockage. Bien que ces changements soient attendus dans les systèmes naturels, leur surveillance est cruciale pour garantir la performance du produit et la sécurité du consommateur. L’analyse statistique a révélé un effet significatif du temps sur le pH, comme l’indique la valeur p corrigée de Greenhouse–Geisser de 0,047, tandis qu’aucune variation significative (p > 0,05) n’a été observée dans les échantillons testés.

La stabilité de la viscosité est critique pour l’utilisabilité, la durée de conservation et la performance des émulsions cosmétiques, en particulier pour garantir l’étalabilité et la satisfaction du consommateur. L’émulsion à blanc et les Crèmes A et B n’ont produit aucune variation significative à 50 et 100 tr/min (p = 1). La réponse rhéofluidifiante observée à travers les formulations, en particulier dans les Crèmes C et D qui variaient significativement (p ≤ 0,01) du reste des émulsions, est indicative d’un comportement pseudoplastique souhaitable commun aux émulsions bien structurées d’origine végétale. Les variations de viscosité sont étroitement liées à la concentration d’extrait et au système de solvant utilisé, où une teneur phénolique plus élevée contribue probablement à des réseaux de liaisons hydrogène plus forts et à une intégrité de matrice améliorée. Les crèmes enrichies en extraits d’A. glutinosa, en particulier la Crème C, ont maintenu une consistance rhéologique et démontré une performance structurelle optimale au fil du temps. Ces résultats s’alignent avec des recherches antérieures sur les émulsions botaniques, soutenant le potentiel des extraits d’A. glutinosa dans la création de formulations cosmeceutiques stables et conviviales pour le consommateur.

La coloration plus profonde de la Crème D est attribuée à la solubilité et à la capacité d’extraction supérieures de l’éthanol pour les polyphénols chromophores tels que les flavonoïdes, les tanins et les diarylheptanoïdes. Ces composés possèdent des systèmes conjugués qui non seulement améliorent la pigmentation mais contribuent aussi significativement à l’activité antioxydante et photoprotectrice. Des résultats similaires ont été rapportés par Wathoni et al. qui ont observé une corrélation directe entre la teneur en polyphénols et l’intensité visuelle dans les émulsions d’origine végétale. De plus, les tendances de couleur constantes observées — en particulier l’intensité pigmentaire accrue dans la Crème C — mettent en évidence le double rôle de la couleur comme indicateur à la fois esthétique et fonctionnel. Les émulsions plus foncées sont typiquement plus riches en composés bioactifs et offrent donc un potentiel thérapeutique amélioré, en accord avec les objectifs globaux de la formulation cosmeceutique.

Les radicaux libres figurent parmi les principaux facteurs de vieillissement cutané, et les antioxydants sont donc des ingrédients cosmétiques fonctionnels courants. Les extraits d’A. glutinosa contiennent des phénoliques qui présentent une excellente activité de piégeage des radicaux libres. L’écorce d’A. glutinosa possède en effet une teneur phénolique totale élevée (jusqu’à ~71 % p/p en équivalents d’acide gallique) et présente une activité antioxydante élevée. L’analyse statistique a révélé un fort effet du temps sur l’activité antioxydante (%) dans tous les cas, comme l’indique la valeur de Greenhouse–Geisser (p < 0,01). La forte inhibition initiale du DPPH observée dans les échantillons non dilués confirme la capacité antioxydante élevée des crèmes enrichies en extrait d’A. glutinosa, en accord avec les données rapportées sur les extraits végétaux riches en polyphénols. Le piégeage rapide des radicaux observé dans les premières minutes suggère une concentration élevée de fractions antioxydantes réactives, telles que les groupes hydroxyle phénoliques, capables de donner des atomes d’hydrogène ou des électrons pour stabiliser les radicaux DPPH. À la dilution 1:10, les différences marquées de performance antioxydante entre les formulations à haute teneur en extrait et à faible teneur en extrait sont devenues plus prononcées. Les crèmes à concentrations d’extrait plus élevées (A et D) ont maintenu une capacité de piégeage substantielle, tandis que les Crèmes B et C ont montré une neutralisation des radicaux significativement limitée (p < 0,05). Cela suggère que la concentration d’extrait influence directement l’efficacité antioxydante, probablement en raison d’une teneur phénolique insuffisante dans les formulations à plus faible teneur en extrait pour conduire la réaction DPPH à son terme. Une interférence possible de la matrice de la crème (par ex. émulsifiants, huiles) à cette dilution peut également entraver la réactivité. À la dilution 1:100, l’efficacité antioxydante a décliné, comme attendu lorsque la dose d’antioxydant tombe en dessous du seuil nécessaire pour neutraliser complètement les radicaux DPPH. Le schéma cinétique à double phase — inhibition initiale rapide suivie d’une augmentation plus lente — correspond aux modèles antérieurs de piégeage des radicaux phénoliques observés par Angeli et ses collaborateurs. Ces résultats s’alignent également avec les conclusions de Mishra et al. qui ont rapporté que l’efficacité antioxydante est dépendante de la concentration et influencée par l’environnement de la matrice. Globalement, ces résultats renforcent le rôle des extraits d’A. glutinosa comme agents antioxydants puissants dans les formulations topiques. Leur activité fournit des preuves à l’appui d’effets anti-âge et protecteurs de la peau potentiels.

La préoccupation scientifique concernant les produits chimiques artificiels des écrans solaires et leurs effets secondaires (irritation cutanée, perturbation hormonale et toxicité environnementale) a orienté la science vers les écrans solaires naturels. Il a été démontré que les composés phénoliques présents dans A. glutinosa agissent non seulement comme absorbeurs d’UV mais aussi comme piégeurs de radicaux qui atténuent le stress oxydatif induit par les ultraviolets (UV), améliorant la photostabilité et l’efficacité des formulations d’écrans solaires. Les tests cellulaires in vitro jouent un rôle crucial dans la recherche sur la photoprotection en fournissant des systèmes contrôlés et reproductibles pour évaluer la réponse cellulaire au rayonnement UV et l’efficacité des agents photoprotecteurs. Ces tests permettent une évaluation détaillée de la viabilité cellulaire, des dommages à l’ADN, du stress oxydatif et de l’apoptose dans les cellules cutanées telles que les kératinocytes et les fibroblastes. Les recherches futures devraient inclure des investigations détaillées de la perméation cutanée et de la biodisponibilité des composés actifs des émulsions d’Alnus glutinosa à l’aide d’études cliniques, de modèles cutanés in vitro ou ex vivo, ou de membranes Strat-M® pour mieux comprendre leur absorption et leur efficacité dans les applications topiques. De plus, des études comparatives avec d’autres antioxydants naturels bien connus et extraits protecteurs UV fourniraient des informations précieuses sur l’efficacité relative d’A. glutinosa, aidant à le positionner plus clairement au sein du marché cosmeceutique naturel.

5. Conclusions

Dans cette étude préliminaire, des extraits d’Alnus glutinosa ont été, à notre connaissance, incorporés pour la première fois dans des émulsions cosmétiques, avec leur composition, leur stabilité physique et leur capacité antioxydante systématiquement évaluées. Grâce à la comparaison de diverses méthodes d’extraction, de solvants et de leur intégration dans des formulations cosmétiques, la recherche a identifié les conditions les plus efficaces pour maximiser les bénéfices et garantir la stabilité de la formulation.

Diverses procédures d’extraction ont été mises en œuvre et, parmi elles, l’extraction Soxhlet à l’éthanol — en raison de sa polarité relativement plus faible par rapport à l’eau — s’est révélée être le solvant le plus efficace, avec le taux d’extraction le plus élevé de phytochimiques (42,5 %). L’analyse LC-HRMS Orbitrap a confirmé l’identification et la quantification de plusieurs composés bioactifs d’intérêt, qui ont été rapportés comme possédant de fortes propriétés antioxydantes et photoprotectrices. Comme attendu, les émulsions à concentration plus élevée d’extraits ont présenté une plus grande activité antioxydante, avec une activité de piégeage du DPPH supérieure à 85 % pour les échantillons dilués, qui restait également à des niveaux élevés même pour des dilutions plus fortes. Les études de stabilité ont garanti que toutes les formulations étaient dans la plage de pH approuvée (entre 5 et 6) après la période de test de 35 jours et présentaient de bonnes propriétés rhéologiques, telles que la pseudoplasticité et la viscosité à long terme. Enfin, l’analyse colorimétrique a soutenu l’efficacité des extraits, montrant que les émulsions à coloration plus intense — reflétant une teneur phénolique plus élevée — étaient associées à une activité antioxydante accrue.

Les résultats de ce travail préliminaire suggèrent que la riche teneur phytochimique des extraits d’Alnus glutinosa soutient leur potentiel comme ingrédients naturels et multifonctionnels pour la préparation de formulations cosmeceutiques potentiellement antioxydantes et photoprotectrices. Globalement, cette étude fournit une évaluation préliminaire des formulations cosmeceutiques enrichies en aulne par caractérisation physicochimique. Bien que les extraits naturels, tels qu’A. glutinosa, soient généralement considérés comme sûrs pour les applications dermiques, des expériences supplémentaires — telles que des tests de biocompatibilité avec des lignées cellulaires cutanées humaines, des modèles cutanés tridimensionnels et des tests cellulaires de piégeage des ROS et de photoprotection UV — étayeraient davantage les présentes conclusions préliminaires. L’incorporation de ces expériences dans de futurs travaux renforcera les preuves de sécurité et d’efficacité, fournissant finalement une évaluation plus complète et scientifiquement robuste des formulations étudiées.